Desde a chegada a Espanha de Carlos da Áustria filho de Filipe, o Belo E Joana louca o nome de Isabel de Portugal Ele lembrava fortemente uma possível esposa do monarca. Os problemas internacionais em torno da ascensão ao trono do Império Alemão atrasaram o casamento, entre outros motivos, devido à promessa de Carlos de Henry VIII casar com sua filha María, de apenas quatro anos. A traição dos ingleses, o apoio dos nobres castelhanos e a necessidade de uma fortalecer a aliança com Portugal fazer com que o monarca espanhol decidisse em 1525, após sete anos de indecisão, casar-se com Isabel de Portugal, filha de Manuel I de Portugal e Maria de Castela filha de Reis católicos . Este acordo previa o casamento do irmão da portuguesa, João III com Catarina da Áustria irmã do rei da Espanha.

Portanto, o 1º de novembro de 1525 foi oficializado casamento por procuração mesmo que tivesse que ser repetido 20 de janeiro de 1526 Por serem primos de primeiro grau, precisavam de uma segunda dispensa papal.

No final de janeiro, Isabel sai de Portugal com destino a Espanha. Receberam-no entre Elvas e Badajoz no dia 7 de fevereiro Duque da Calábria ele arcebispo de Toledo e a Duque de Béjar . De lá viajaram para Sevilha, onde seria celebrado o noivado.

Ele 3 de março de 1526 Isabella chega a Sevilha . Ele entrou pelo portão da Macarena. Sevilha a recebeu com suas melhores roupas. Um dossel de ouro, prata, pedras preciosas e pérolas o acompanhava em suas caminhadas pelas ruas da cidade. Da Macarena à Catedral foram instalados sete arcos triunfais que simbolizava as virtudes do bom soberano: prudência -na Puerta de la Macarena-, força -Santa Marina-, clemência -San Marcos-, Paz -Santa Catalina-, justiça -San Isidoro-, Fé -El Salvador- e Glória . – os degraus da Catedral. De cada lado deste último arco havia dois braseiros perfumados. A catedral foi adornada com luxuosas tapeçarias, joias e castiçais.

O as ruas da cidade foram decoradas Com arquitetura efêmera, tapeçarias, tochas, as pessoas na rua acolheram a Infanta com muito carinho.

Para o seu chegada à Catedral na Puerta del Perdón, o Capítulo da Igreja a recebeu com todo o clero e as cruzes das igrejas da cidade que a acompanharam dentro da Catedral de Sevilha onde Isabel rezou em frente ao altar-mor e depois saiu pela outra porta para ir ao Alcázar, onde aguardaria a chegada do seu marido, o Imperador.

Uma semana depois, Em 10 de março, seria Carlos V que repetiria o caminho percorrido anteriormente por sua futura esposa. Da Puerta de la Macarena dirigiu-se à Catedral passando pelos sete arcos triunfais, sob aplausos e elogios dos sevilhanos. Chegando à Porta do Perdão, entrou acompanhado do Te Deum laudamus – hino de ação de graças – no Altar-Mor, onde rezou e depois partiu para o Alcázar ao encontro de Isabel.

Segundo os cronistas da época, o amor à primeira vista foi imediato e Carlos garantiu que o casamento fosse celebrado naquela mesma noite. A cerimônia, presidida pelo Cardeal Salviati. aconteceu durante o curso Salão dos Embaixadores . Os padrinhos foram o Duque da Calábria e a Condessa de Odenura y Faro. À meia-noite, foi erguido um altar no quarto de Isabel, onde o Arcebispo de Toledo Ele celebrou uma missa e cuidou dos noivos .

As comemorações tiveram que ser adiadas devido morte de Isabel da Áustria , Rainha da Dinamarca e irmã do Imperador e para a Semana Santa. Além disso, foram menos grandiosos do que o esperado, embora houvesse celebrações por toda a cidade, torneios, justas e touradas.

O casamento em Sevilha marcou o início de uma viagem dos monarcas pela Andaluzia que terminaria em Granada, 4 de junho de 1526 .